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运用于STR分析的技术分析时间非常短，仅需数秒即可完成

来源： 中国亲子鉴定基因检测中心 日期：2012-04-12 点击： 16 属于： 新闻中心

MALDI-TOF质谱仪飞行时间质谱技术是一种具有大规模样本处理能力，已被证明能够运用于STR分析的技术(Hou et al. ，2006)。上海亲子鉴定质谱技术具有多种分析功能，包括离子检测及质量-电荷比测定。由于离子在真空环境中分离，因而分析时间非常短，仅需数秒即可完成。如与自动化样本制备结合，飞行时间质谱仪一天能够处理』气千个DNA样本。为了使DNA分子在质谱仪内气化，采用了一种称为基质辅助激光解离离子化(matrix-assisted laser desorption-ionization, MALDD 的技术。MALDI与飞行时间质谱技术联合运用则通常被称为MALTI-TOF-MS。运用MALTI-TOF-MS进行DNA分析的步骤如下：液态的DNA样本与过量的基质混合物混合，如3-羟基甲代吡啶酸，将样本点样于金属或硅板上；上海亲子鉴定随着样本在空气中干燥，DNA与基质共结晶；然后将载样板置入质谱仪的真空环境中进行分析；快速激光脉冲随之激发离子化过程。包绕DNA的基质分子在离子化的过程中可以防止DNA断裂。每次激光脉冲激发样本的离子化（使待测分子带电荷），并使离子化的待测分子进入飞行管中分离。DNA离子根据其质量大小在几百毫秒内分别到达检测点。由于形成最终质谱存在多个脉冲发射和平衡的过程，因而分析每个样本需要数秒钟的时间。更换固定激光束下的载样板即可连续进行样本分析。现在已有一次对384个或者更多样本进行分析凼冈仰～一可供选择。上海亲子鉴定每个载样板的分析时间少于lh，这主要取决于每个样本所获得的激光照射次数和激光脉冲频率。飞行时间质谱技术进行PCR产物（如STR)分析也面临着一些困难，其中最主要的问题就是当DNA片段过大或样本盐浓度过高时，质谱仪的分辨率和灵敏度会降低是现但是现在已有成功运用MALTI-TOF-MS质谱技术进行上海亲子鉴定STR遗传标记分析的例子，主要是重新设计引物使其更靠近重复区域，从而缩短了扩增片段的长度。飞行时间质谱技术除了样本分析速度快外，另外一个优点是准确性高，可以高度精确地测定等位基因片段的分子质量，进行STR分型时可以不需要ladder作为参照。而传统STR分型技术，由于温度和电压的波动，在电泳分离系统中通常需要使用等位基因ladder和内标，以调节峰迁移时间的微小变异。由于MALTI-TOF-MS系统昂贵的价格及荧光技术的广泛接受和运用，i质谱技术还不大可能成为法医STR分析的主流技术。但是鉴于MALTI-'汾妣是进行单核苷酸多态性(SNP)分析的有效技术，因此，随着SNP在法医DNA 分析中的广泛应用，该技术将扮演越来越重要的角色。

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